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        如何分离培养微生物肥料菌种

        发布时间:2019-12-20 08:05 | 浏览量:

            分离肥料菌种是筛选的第一步,任务是获得多样化的不同种类的菌株,供进一步筛选之用。土壤是微生物生长发育的良好环境。所以,微生物肥料菌种主要是从土壤分离。由于土壤中有多种微生物,为了分离得到不同微生物,应选择培养基进行分离。

         菌株的分离与纯化    
            (1)稀释法
            称取采集的土壤样本l0g,置入装有小玻璃珠的l00mL无菌水的250mL三角瓶中,振荡20min,即制成10%的土壤悬浮液,放置30s后,用无菌吸管按每级稀释10倍的顺序制备系列的土壤稀释液。稀释液的稀释度是由土壤中的目的菌含量决定的。稀释度过大,造成出菌率过低;稀释度过小,会使分离的菌落过密,影响分离和纯化。所以应做预备试验,以确定适宜的稀释倍数。
            (2)弹土法   
            将风干土壤研细过筛后,取一定量的细土平铺于光滑圆硬纸板(大小约为培养皿的直径)上,再将多余的倒掉,使纸板上微微见有细土黏附。接种时将纸板的黏土面轻轻覆盖在培养基平板上,并用手指轻轻弹动一下立即取下,则有一层土壤微粒均匀地散落在平板上。取下的土样纸板仍可连续用于第二、第三和第四套培养皿,通过土壤量的递减,以达到控制理想的出菌率。
            (3)混土法
            先将2%左右的水琼脂15mL倒入培养皿制成平板,成为底层培养基,然后称取1~2mg研细的土样与20mL已融化的分离培养基混匀,吸取5mL,于已凝固的水琼脂平板上铺平,进行分离培养。
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